
服务介绍:
PAS染色试剂盒说明书
货号M035
原理与应用
过碘酸(Periodic acid)是一种氧化剂,它可把多糖的葡萄糖分子的2个相邻的带有羟基的-C-C-键打开,而生成醛基再与染色剂结合。Schiff试剂中的碱基复红液进行结合时呈紫红色。糖原能溶于水,在酶的作用下很容易分解为葡萄糖,而葡萄糖更易溶于水。当机体死亡后,其糖原有很快分解为葡萄糖。根据糖原的特性,必须及时取新鲜组织用特殊固定液,才能把糖原保存下来。所以,一些水性固定液都不适合对糖原的固定。Carnoy固定剂是目前最理想的固定剂,可显示早期心肌梗死的心肌病变。在早期心肌病变时,糖原减少或消失。
PAS染色液不仅能显示糖原,还能显示中性粘性物质和某些酸性粘性物质及软骨、脑垂体、霉菌、脂质、色素、淀粉样物质及基底膜等。
试剂盒组成
产品编号
试剂名称
体积(ml)
M035A
过碘酸溶液
30ml
M035B
Schiff试剂
30ml
M035C
苏木素
30ml
M035D
Cornoy固定液
30ml
操作步骤
1. 石蜡切片3-5um,脱蜡至水洗(冰冻切片5-8um,Cornoy固定液固定15min);
2. 蒸馏水洗1-2min;
3. 用过碘酸溶液氧化5-10min(阴性对照片不需要氧化);
4. 蒸馏水洗3遍,每遍5min;
5. 入Schiff试剂染色8min(如果低温可以适当延长染色时间);
6. 蒸馏水洗3遍,每遍5min;
7. 入苏木素溶液染核2-3min;
8. 蒸馏水洗3遍,每遍5min;
9. 逐级乙醇脱水,二甲苯透明,中性树脂封固。
染色结果
糖原及其他PAS反应物质均呈红色,细胞核呈蓝色。
体会与说明
1. 实验可以设阴性片,阴性对照片不需要过碘酸氧化,其他实验步骤一样。
2. 过碘酸氧化时间随温度变化而变化,若温度高作用时间长结果会出现假阳性,其氧化时间应控制在5-10min,环境温度不高于20℃为宜,室温稍高作用时间适当缩减。
3. 如果Schiff试剂变为橘红色或者粉红色时,说明试剂变质失效,不能再用。
4. 苏木素宜淡染。
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