
服务介绍:
Gordon-Sweet网状纤维染色试剂盒说明书
货号:M043
原理:
网状纤维是由网状蛋白所构成,分支成束,交织成网的纤细纤维。这种纤维没有弹性而又有韧性,能抗胃液的消化和弱酸的溶解。HE染色很浅,镀银染色则被染为黑色,电镜下观察网状纤维和胶原纤维两者一样,故可以认为网状蛋白又可视为一种特殊的胶原蛋白。
利用网状纤维的特殊染色,显示和判定病变组织支架的破坏情况,组织、脏器网状支架的存在与塌陷、完整与破坏、网状纤维的分布及走行、有无及多少、粗细、疏密、有无断裂等形态变化。常用于肿瘤的性质、来源;用于某些肿瘤的诊断;用于观察和研究肿瘤组织的发生、发展及恶性程度;显示与观察组织中基底膜的变化等。
Gordon-Sweet法发表于1936年,是显示网状纤维的一种快速染色法。染色时间短、结果稳定、不易脱片等优点,故较为常用。
组织固定:
用10%甲醛溶液、4%多聚甲醛固定液或者其他固定液都行。
试剂盒组成:
产品编号
产品名称
包装
M043A
氨银溶液
50ml
M043B
高锰酸钾溶液
50ml
M043C
硫酸水溶液
2.5ml
M043D
草酸溶液
50ml
M043E
硫酸铁铵水溶液
50ml
M043F
氯化金溶液
10ml
M043G
硫代硫酸钠溶液
50ml
实验流程:
1. 石蜡切片3-6um,脱蜡至水洗;
2. 蒸馏水溪2-3min;
3. 将高锰酸钾溶液和硫酸水溶液按20:1体积比混合,现配现用,用多少配多少。即为酸性高锰酸钾溶液。
4. 用酸性高锰酸钾溶液氧化5min;
5. 蒸馏水稍洗;
6. 用草酸水溶液处理1-2min,至切片被漂白即可。蒸馏水稍洗;
7. 用硫酸铁铵水溶液媒染5-10min或更长时间;
8. 蒸馏水洗3-5min;
9. 用氨银溶液染色10-40Sec(视氨银溶液配制时间长短而定,时间越长染色也越长);
10. 蒸馏水速洗;
11. 用10%甲醛溶液还原30-60Sec,蒸馏水洗2-3min;
12. 用氯化金水溶液调色1-2min,蒸馏水洗2-3min;
13. 用硫代硫酸钠溶液固定3-5min,自来水充分水洗;
14. 如果需要,可以用1%中性红、VG染液、明矾苏木素复染。
15. 95%酒精及无水酒精脱水、二甲苯透明,中性树胶封固。
染色结果:
网状纤维呈黑色,胶原纤维呈灰色或复染的颜色。
保质期:试剂盒保质期为3-4周
体会与说明:
1. 氨银溶液的染色时间视溶液的新旧不同而异,配制较久的染液需适当延长染色时间;
2. 氯化金调试时间视具体情况而定,要镜检,适当即可;
3. 实验流程中要求的蒸馏水水洗,不可用自来水代替,实验中的试剂、溶液及器皿一定要清洁、纯净。防止与氨银溶液起化学反应。
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