服务介绍：

吖啶橙荧光染色法

货号：M084

原理：

吖啶橙（acridine orange，AO）是最经典的极灵敏的荧光染料，它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光。其激发峰为492nm，荧光发射峰为530nm（DNA）、640（RNA），它与双链DNA的结合方式是嵌入双链之间，而与单链DNA和RNA则由静电吸引堆积在其磷酸根上。在蓝光（502nm）激发下，细胞核发亮绿色荧光（约530nm），核仁和胞质RNA发橘红色荧光（>580nm）。吖啶橙的阳离子也可以结合在蛋白质、多糖和膜上而发荧光，但细胞固定阻抑了这种结合，从而主要显示DNA、RNA两种核酸。

试剂盒组成：

保存条件：

4℃避光保存。

使用说明：

本试剂盒可以适用口腔黏膜上皮细胞临时制片、细胞爬片、冰冻切片等标本。

吖啶橙染色液10X临用前用0.1M pH7.0PBS做10倍稀释后即为吖啶橙工作液

（1）取处理好的口腔黏膜上皮细胞涂片、细胞爬片、冰冻切片。

（2）95%乙醇溶液固定5min。

（3）滴加吖啶橙工作液染色5min。

（4）盖上盖玻片，吸水纸吸去盖玻片周围多余液体，镜下观察。

结果与观察

荧光显微镜下（选用蓝色激发滤片），可见含DNA的细胞核显示黄绿色荧光，含RNA的细胞质及核仁显示橘红色荧光 。荧光显微镜：WIB，光是蓝色的那个

注意事项：

（1）每种荧光染料，均有自己的最适pH，此时荧光最强。当pH改变时，不仅荧光强度减弱，而且波长将有所改变，因此荧光检测时要在一定的pH缓冲液中进行。

2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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