
服务介绍:
甲基绿染色液
货号:M090
原理与方法:
甲基绿染色液(Methyl Green Staining Solution)是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成绿色的染色液。
试剂盒组成:
产品编号
产品名称
包装
M090
甲基绿染色液
100ml
保存条件:
4℃避光保存。
使用说明:
1. 样品处理
注:如果用于免疫组化等染色后的复染,可以参考上述步骤在其它染色完成后直接进行甲基绿染
结果与观察
细胞核呈绿色
注意事项:
1、 需自备4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理,还需自备二甲苯,中性树胶或其它封片剂。
2、 如果样品是石蜡切片,需自备90%乙醇,无水乙醇以及二甲苯.
3、 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
4、 为了您的健康请做适当防护.
甲基绿可以和细胞核中的DNA结合,从而产生细胞核染色。
本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在本甲基绿染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色,另一方面也可以在免疫组化染色后再进行甲基绿复染。
一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。
a) 对于石蜡切片:
二甲苯中脱蜡5-10分钟。
换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10分钟。
无水乙醇5分钟。
90%乙醇2分钟。
70%乙醇2分钟。
蒸馏水2分钟。
b) 对于冰冻切片:
蒸馏水2分钟。
c) 对于培养细胞:
用4%多聚甲醛固定10分钟以上。
蒸馏水洗涤2分钟。
换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2分钟。
2. 甲基绿染色
对于上述处理好的样品:
甲基绿染色液染色5-10分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。
蒸馏水洗涤两次(每次数秒钟,此时片子看起来呈蓝色,脱水透明后会呈绿色)。
95%乙醇5秒。
此时,如果需要直接观察,可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行,70%乙
醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。
色。
3. 脱水、透明、封片或进行其它染色
a) 脱水、透明、封片:
95%乙醇脱水2分钟。
换用新鲜的95%乙醇再脱水2分钟。
二甲苯透明5分钟。
换用新鲜的二甲苯,再透明5分钟。
用中性树胶或其它封片剂封片。
显微镜下观察,细胞核呈绿色或蓝绿色。
b) 进行其它染色:
如果进行免疫荧光染色,或进行Hoechst等荧光染料的染色,在甲基绿染色液染色后:
70%乙醇洗涤2次,每次2分钟。
PBS或生理盐水或TBS或TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5分钟。
然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。
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