服务介绍：

DAB NBT染色试剂盒

产品货号M108

原 理：

DAB染色法也叫二氨基联苯胺法，用于检测细胞中过氧化物酶的活性部位。细胞颗粒中的过氧化物酶，能将过氧化氢中的氧释放出来，氧化二氨基联苯胺，形成金黄色沉淀而定位于过氧化物酶活性的部位。

氮蓝四唑(NBT, nitroblue tetrazolium)能与超氧阴离子发生反应并形成蓝色的甲臜(formazan)，基于此原理，NBT溶液（0.1% pH 7.8）可用于植物组织（常用叶片）的超氧阴离子(O2-)检测。

产品包装明细：

DAB底物液：DAB储存液=20:1，现配现用

保存条件：

染色液2-8℃保存，6个月有效。

使用方法：

DAB染色

l. 新鲜植物样本离体后放入6孔板中，做好标记；
2. 每孔中加2mlDAB染色液，没过样本（植物有天然疏水性，可以放青霉素瓶中加入10mlDAB染色液用50ml注射器抽真空）；

3 .将6孔板放摇床上反应4-5h，缓慢摇动；
NBT染色

l. 新鲜植物样本离体后放入6孔板中，做好标记；
2. 每孔中加2ml NBT染色液，没过样本（植物有天然疏水性，可以放青霉素瓶中加入10mlNBT染色液用50ml注射器抽真空）；

3 .将6孔板放摇床上反应4-5h，缓慢摇动；

漂白：

吸除6孔板中的染色液，加4ml漂白液，放90-95℃水浴锅中水浴15min，去除植物中的色素。用新鲜漂白溶液替换漂白溶液并静置30分钟。然后拍照。

结果分析

DAB染色阳性结果为棕黄色颗粒；NBT染色阳性结果为蓝色颗粒。

注意事项：
1．可以用加10mM Na 2 HPO 4 溶液的样本做阴性对照。
2．4小时是DAB染色对于许多生物相互作用形成的最佳时间，其中产生的过氧化氢的水平相当高。如果所研究的相互作用产生较低水平的持续过氧化氢产生，则增加该孵育时间是完全可行的。我们尝试了长达8小时的染色，在测定中没有观察到有害的影响。

3. 漂白溶液体积配比 无水乙醇：乙酸：甘油= 3：1：1
4. 漂白后的样本放漂白液中可以保存4天。

5.植物的不同时期不同取材部位对结果影响很大，请注意取同一时期的同一部位，并做多样本重复。

说明书下载